摘 要: 构建人谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)的CHO细胞表达体系。方法 重组质粒pcDNA3 1 GSTM1用LipofectamineTM2 0 0 0转染CHO细胞 ,用G418筛选细胞的阳性克隆 ,并用PCR、RT PCR和Westernblot进行鉴定 ,测定GSTM1酶活性。结果 GSTM1基因已转染到CHO细胞的基因组 ,并转录表达 ,生成GSTM1蛋白 ,经测定活性达到2 8mmol/ (min·mgprot)。结论 通过CHO GSTM1细胞表达 ,为基因工程生产具有完整功能GSTM1的进一步纯化提供了材料 ,为研究化学致癌物在真核细胞中的代谢 ,作为遗传药理学、毒理学研究的候选细胞株奠定了基础。 |
关键词: GSTM1 序列测定 CHO细胞 细胞转染 表达 |
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基金项目: 河南省自然科学基金资助 (0 0 4 0 2 560 0 ); |
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